[求救] gene knockout on E. coli Chromosome
主要是想研究在E. coli上的某個特殊蛋白,
而需要先將選定的E. coli上 Chromosome做knockout的動作,
之後再做point mutation後,
用plasmid 送回去表現,
並做生化相關的實驗觀察變化。
目前主要是卡在第一階段上對E. coli上的knockout上,
以前只有念過相關原理,
但從沒有做過這類的實驗。
我有參考一些資料和一篇論文,
http://ppt.cc/pvFb
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10829079
也有找到一些相關的KIT網頁,
http://ppt.cc/uEIq
http://ppt.cc/auBu
因為我是我們實驗室第一次做這個實驗的方法,
想請問有沒有人有做過相同的基因剃除實驗,
有沒有推薦的KIT組,
或是操作方法的變化,
或是實驗上要注意的細節提醒。
感謝大家了。
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