[求救] RAW264.7的細胞體外減緩過敏實驗的實驗設計

看板Biotech (生命科學)作者ffmichael229 (御琉光)時間11年前 (2014/10/15 16:01)推噓1(1推 0噓 12→)

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發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出以方便板友幫您追蹤問題若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等）之分讓，請務必註明貴實驗室願意設立正式合作或簽署材料分讓協議(MTA)，否則版工將逕行刪除 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 目前實驗的設計是想做細胞體外減緩過敏的實驗，實驗已選定某種成分做為材料，希望這種成分能有減緩過敏的效果，因此就想看某些細胞激素(cytokine)的分泌狀況(例如: IL-10 IL-4)，實驗的主要的設計是先以藥物溶液(藥物溶液已用MTT抓過濃度)處理RAW 細胞24小時(對照組就不會進行藥物處理)，接著加入LPS進行誘導，然後希望看到有經過藥物先行處理的組別能夠在於細胞分泌IL-10或者IL-4的表現量有所下降，用以証明藥物處理能夠有減緩過敏的效果，但是問題就來了，在網路搜尋文獻的過程中，有遇到LPS要一同添加IFN-r的文獻，也就是LPS+IFN-r，我知道那個是要誘導RAW細胞(NO-t ype)產生NO所添加的東西，但由於我並沒有很深的相關背景，所以並不了解IFN-r的添加與否會不會對我的細胞激素表現實驗造成影響，因此第一個問題想問問若我的實驗單純只以LPS進行誘導是否OK?? ，另外也想請問LPS的用量會是多少比較合適? 由於參考許多文獻從1ng/ml~10ug/ml都有，不過我目前是打算採用1ug/ml，這部分也想請問各位前輩的意見，感謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 111.243.232.3 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1413360071.A.AB7.html