[求救] seeding 96-well/ATPlite 高手

看板Biotech (生命科學)作者時間11年前 (2014/11/06 11:07), 編輯推噓0(008)
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我要把細胞種在96-well plate,加藥後用ATPlite測細胞存活率 但是error bars都超大,在想是因為細胞不均勻還是ATPlite沒做好: 1.細胞調完濃度後倒到dish,用八爪吸200ul加到96-well 但細胞都會聚集在well的邊邊,well中間的細胞都比較少, 請問seed的時候有什麼要特別注意的嗎? 定點加or繞著圓圈加? 慢慢加or快快加? 加玩搖一搖or靜置10~15min? 2.在加完ATPlite的的試劑後都會產生很多泡泡,請問這些泡泡影響儀器偵測冷光嗎? 感恩~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 203.71.94.11 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1415243276.A.832.html

11/06 11:13, , 1F
看描述,種到96well沒有至少放置o/n讓cell貼附?
11/06 11:13, 1F

11/06 11:17, , 2F
96well很好分的,沿壁面正常速度加入,不必搖就很均勻
11/06 11:17, 2F

11/06 11:20, , 3F
另外96well裝到200ul,離溢滿的高度應該不遠了
11/06 11:20, 3F

11/06 15:45, , 4F
有讓細胞貼o/n,隔天才加藥 sorry
11/06 15:45, 4F

11/07 08:14, , 5F
2泡泡會影響
11/07 08:14, 5F

11/07 08:19, , 6F
雖然我覺得你的誤差大是因為泡泡跟細胞是不是在well邊無關
11/07 08:19, 6F

11/07 08:22, , 7F
但可以 試改成loading 100ul
11/07 08:22, 7F

11/11 00:02, , 8F
濃度調100-150ul/well,吸過量在加到well
11/11 00:02, 8F
文章代碼(AID): #1KMkOCWo (Biotech)
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