[求救] MTT assay縮小濃度範圍存活率卻也變低了!

看板Biotech (生命科學)作者 (紙飛機啊歐歐踢欸死)時間11年前 (2014/11/17 15:53), 編輯推噓1(1015)
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最近實驗在做篩選用藥濃度的MTT assay 一開始拉大區間的測試 100/ 125/ 250/ 400/ 500/ 750/ 1000 因為之後要做分化,所以加藥培養三天後才做MTT, 結果出來是400 ug/ml的濃度以上都會死很誇張,存活率都不到一成 而中間的濃度像是250、125也會死個兩、三成(就存活率大概7成多一點), 但濃度100的則是存活率可達九成四! 跟老師討論過後是先試試看濃度100以下的存活率, 於是我就設定了100 / 50 / 25 / 12.5 / 6.25 但我這次跑了三四盤了,100ug/ml的濃度的組別... 存活率只有七成 囧!!! 要到12.5ug/ml的濃度才會達到近九成的存活 為什麼只是把濃度範圍縮小,存活率也降低了阿阿阿阿阿 ㄒ_ㄒ 我使用序列對半稀釋的方式,先配置最大的所需濃度後, 再依序稀釋成需要的濃度。 為什麼結果出來會這樣Q_Q 我實驗的濃度到底要怎麼抓來使用阿阿阿 >_< -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.135.61.97 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1416210816.A.798.html

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既然已經算出存活率 應該是有跟Control比較 感覺是兩次
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control的情況不一樣 導致比值出來存活率有差
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問題可能出在你配的方法 一開始100是由1000稀釋下來
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稀釋後可能很偏離原先的100了
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但第二次最高濃度就是100 所以直接反應100濃度的結果
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當然也有可能因為配藥方的方便度, 1000的好配, 100的反
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而因量太小而產生較大誤差....所以才會遠成第二次死很大
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S大~我有想過跟細胞狀況是不是有關係,但出來的結果
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應該不會差那麼多吧?!
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U大!我最大濃度第二次是配濃度200直接對半稀釋,在猶
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豫是否直接1000再做1/10稀釋?!
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但這樣濃度區間該怎麼判定呢…
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1000做 1/10稀釋沒有必要吧 第一次實驗是幫助你縮小範
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圍 你不如說說你的稀釋用量 用多少體積稀釋了多少
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容不容易造成配置濃度上誤差
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文章代碼(AID): #1KQQc0UO (Biotech)
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