[求救] 用DCF DA染ROS
各位先進大家好
我最近在做DCFDA染色的方式來偵測ROS的表現量
大致上的過程
1.種細胞在96well(貼的細胞)
2.兩天後滿，然後做加藥處理或其他
3.時間到後，用PBS wash。然後配置 20uM的DCFDA在2%的PBS裡
並每格加100ul。
4.45分鐘後，吸掉DCFDA，然後用PBS wash 1次
5.用螢光儀去讀盤
可是發現同一次實驗3重複的情況下，數值跳動很大
3次不同實驗結果也都不太一樣..........
用儀光顯微鏡去看會發現細胞的綠光會越來越強，冏
到底這種實驗該如何做會比較穩定呢??
先感謝各位的幫忙
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