[求救] IHC

看板Biotech (生命科學)作者 (太人生了)時間10年前 (2015/01/16 00:45), 編輯推噓0(009)
留言9則, 4人參與, 最新討論串1/1
大家好 最近把自己表現出來的蛋白質 給生技公司打完抗體 開始染IHC 用的是biogenex immunohistochemistry KIT 之前的問題解決了 ( 把生技公司附上的兔子normal serum 改成 commerical goat normal serum) 就不是整片陽性singal了 ---------------------------------------------------------------------- 但現在又出問題了 我的target cell會鎖定在軟體動物的神經上的病毒 但現在不管是染(跑PCR病毒陽性片或陰性)的病理切片 在神經的細胞上都有些許的訊號 導致現在無法確定這抗體的專一性 請問我接下來該如何trouble shooting.. ----------------------------------------------------------------------- 另一個問題是 我的ㄧ抗是rabbit anti-我的protein 而我的二抗是commerical的KIT裡面的 為什麼再blocking的時候, 放rabbit serum 整片就都上陽性 而改用goat serum就比較正常 照道理我的組織切片不會有兔子血清裡的任何抗體給結合上阿 謝謝大家 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.218.47 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1421340319.A.3C1.html

01/16 01:09, , 1F
你一抗是rabbit anti-protein,二抗不就是xxx anti-rabbit
01/16 01:09, 1F

01/16 01:17, , 2F
你一抗是rabbit 又用rabbit serum blocking?!
01/16 01:17, 2F

01/16 01:19, , 3F
二抗下去當然全部中獎阿....
01/16 01:19, 3F

01/16 02:22, , 4F
= = " 是的..
01/16 02:22, 4F

01/16 02:24, , 5F
它那張抗體公司的表就叫我用來稀釋一抗與當serum阿..
01/16 02:24, 5F

01/17 09:15, , 6F
如果病毒確定不會出現在其他動物,可以找別的物種切片
01/17 09:15, 6F

01/17 09:16, , 7F
當做negetive control,然後找一片確定有病毒的軟體神經
01/17 09:16, 7F

01/17 09:17, , 8F
切片,當作positive,比較看看兩者的差異
01/17 09:17, 8F

01/20 11:29, , 9F
roger that
01/20 11:29, 9F
文章代碼(AID): #1Kj-wVF1 (Biotech)
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