[求救] IHC
大家好
最近把自己表現出來的蛋白質 給生技公司打完抗體
開始染IHC
用的是biogenex immunohistochemistry KIT
之前的問題解決了
( 把生技公司附上的兔子normal serum 改成 commerical goat normal serum)
就不是整片陽性singal了
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但現在又出問題了
我的target cell會鎖定在軟體動物的神經上的病毒
但現在不管是染(跑PCR病毒陽性片或陰性)的病理切片
在神經的細胞上都有些許的訊號
導致現在無法確定這抗體的專一性
請問我接下來該如何trouble shooting..
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另一個問題是
我的ㄧ抗是rabbit anti-我的protein
而我的二抗是commerical的KIT裡面的
為什麼再blocking的時候, 放rabbit serum
整片就都上陽性
而改用goat serum就比較正常
照道理我的組織切片不會有兔子血清裡的任何抗體給結合上阿
謝謝大家
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