PTT職涯區 / Biotech (生命科學)

[求救] 3T3-L1分化

看板Biotech (生命科學)作者 (pig)時間10年前 (2015/01/13 15:28), 編輯推噓3(3推 0噓 13→)
留言16則, 4人參與, 最新討論串1/1
小弟最近在養脂肪細胞 但是覺得養不太好 分化的時候總是會有幾個well的細胞有開始脫落的現象 想請問板上有沒有 有經驗的可以分享一些在誘導分化的時候的小撇步 可以盡量減少這個情況的發生 謝謝大家了 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.79.120 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1421134099.A.017.html
推
01/13 19:49, , 1F
Gelatin coating your plates
01/13 19:49, 1F
→
01/14 08:26, , 2F
分化的medium會使細胞比較不貼,建議種多一點看看！
01/14 08:26, 2F
推
01/15 14:17, , 3F
代數問題 可以試著全部都不加antibiotics 我的經驗是能
01/15 14:17, 3F
→
01/15 14:18, , 4F
稍微幫助 但也應該要準備買新的細胞了 3T3L1是有限的
01/15 14:18, 4F
→
01/15 15:33, , 5F
代數大概在多少以內的比較適合呢？
01/15 15:33, 5F
推
01/20 16:01, , 6F
這很難講 現在從ATCC或BCRC買到的都是unknown 但基本上
01/20 16:01, 6F
→
01/20 16:02, , 7F
他們手上會出貨的都還是有分化能力 就我經驗 BCRC去年買
01/20 16:02, 7F
→
01/20 16:03, , 8F
的 好像從PU+6開始 我用到PU+12左右就快撐不住了 如果有
01/20 16:03, 8F
→
01/20 16:03, , 9F
可仰賴的實驗室能分享年輕一點的細胞或許能要看看
01/20 16:03, 9F
→
01/20 16:05, , 10F
subculture請用1xPBS wash兩次 0.5x trypsinize 1min
01/20 16:05, 10F
→
01/20 16:06, , 11F
70%前一定要subculture 並且不能太稀 頂多1:4-1:6
01/20 16:06, 11F
→
01/20 16:07, , 12F
吸differention medium時 不要吸太乾淨 也離細胞遠一點
01/20 16:07, 12F
→
01/20 16:08, , 13F
6-well plate是我目前的極限 以前都可以用12-well輕鬆做
01/20 16:08, 13F
→
01/20 16:10, , 14F
如果細胞邊緣一直容易脫落 enlarge scale是可行辦法
01/20 16:10, 14F
→
01/20 16:10, , 15F
我目前能想到的就是這樣了 在這個3T3-L1末法時代走過4年
01/20 16:10, 15F
→
01/20 16:11, , 16F
不得不想辦法存活啊
01/20 16:11, 16F
‣ 更多 a14743535 的文章
文章代碼(AID): #1KjCaJ0N (Biotech)
Biotech 近期熱門文章
更多 近期熱門文章 >>
PTT職涯區 即時熱門文章
更多 即時熱門文章 >>
‣ 更多 a14743535 的文章
文章代碼(AID): #1KjCaJ0N (Biotech)