[求救] qPCR的CT值與data牢靠性
我是real time PCR新手
想來請教大家下面幾個data處理和判讀問題
計算方式是用相對定量
internal control是用 Gapdh
遇到的問題是:
1. 實驗結果的CT值好像都會有浮動現象，
一般來說，怎樣的數據結果是可用的，是否有criteria可以參照?
internal control的變異性必須在怎樣的固定範圍內,其數據的RQ值才可信賴
例如 Gapdh CT值需落於20-30之間，甚至於23-27標準
2. real time PCR這種實驗，怎樣的數據才算是一個牢靠性夠的結果?
除了3重複可使實驗現象的有再現性，還有什麼需要注意的地方?
比方做western blot 大家都希望internal control 的band是較一致的，
這樣大家才願意去相信他的實驗結果
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