PTT職涯區 / Biotech (生命科學)

[討論] 數完細胞後如何種細胞?

看板Biotech (生命科學)作者 (chaichi)時間10年前 (2015/03/12 22:14), 編輯推噓8(8推 0噓 10→)
留言18則, 8人參與, 最新討論串1/1
不好意思 我知道,這是一個很蠢的問題 但我還是覺得很困擾 是這樣的 我數細胞的方式是PBS洗過7.8分滿的細胞後 使用trypsin切下細胞 吸到15CC離心管 離心後,吸掉上輕液 因為胚很大 所以我用5CC medium去沖散胚 然後開始使用血球計數器來計算細胞 10ul細胞+10ultrypan blue 假設我算出500顆細胞 我算四格 套入公式=300/4再X2X10000=1500000 那我想要再種500000個細胞進入dish內 請問我要吸多少體積的細胞進入? 是直接1500000/500000就好? 還是我要把我數完細胞代入公式算出的1500000再乘以我用5CC的medium去打散胚 然後再用我想種的細胞數500000/(1500000X5)? 請問是應該用哪一種算法? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 114.46.193.140 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1426169686.A.3AA.html
推
03/12 23:43, , 1F
去看一次公式怎麼來的就不會忘了
03/12 23:43, 1F
→
03/12 23:44, , 2F
比較5cc或只用1cc去打散,得到的計數細胞數會不一樣嗎？
03/12 23:44, 2F
推
03/13 00:42, , 3F
你要種500000的final volume是多少
03/13 00:42, 3F
推
03/13 00:44, , 4F
用5cc沖散的那些細胞濃度就是1500000cells/ml
03/13 00:44, 4F
推
03/13 00:48, , 5F
最簡單就是你把那5cc dilute3倍(就是再加10cc media) 混
03/13 00:48, 5F
→
03/13 00:48, , 6F
均勻之後取這其中1cc裡面就有你要的500000個細胞
03/13 00:48, 6F
→
03/13 03:16, , 7F
我是要種到6cm的dish內
03/13 03:16, 7F
推
03/13 05:46, , 8F
那你可以拿1ml的5cc dilute3倍的溶液到6cm dish
03/13 05:46, 8F
→
03/13 05:46, , 9F
再用無細胞的media補到夠cover整個well的volume就可以了
03/13 05:46, 9F
→
03/13 14:09, , 10F
算了500顆，公式裡面卻是300/4??
03/13 14:09, 10F
→
03/13 14:20, , 11F
我看完有跟樓上一樣的疑問 還在想這公式和我背得不太一
03/13 14:20, 11F
→
03/13 14:20, , 12F
樣...
03/13 14:20, 12F
推
03/13 18:19, , 13F
300應該是筆誤吧XD 不過這樣變成要dilute 5倍
03/13 18:19, 13F
→
03/14 00:50, , 14F
抱歉,300那個是筆誤,應該是500去除
03/14 00:50, 14F
→
03/14 00:51, , 15F
感謝大家的回答,我懂要怎麼辦了
03/14 00:51, 15F
推
03/14 14:33, , 16F
算出150000是濃度單位cell/mL，當然是用要種的數目除濃
03/14 14:33, 16F
→
03/14 14:34, , 17F
度 500000/1500000才對阿。上面少打一個0
03/14 14:34, 17F
推
04/18 12:27, , 18F
我通常不會算超過300顆耶，因為太多會不準
04/18 12:27, 18F
‣ 更多 chaichi 的文章
文章代碼(AID): #1L0PzMEg (Biotech)
Biotech 近期熱門文章
更多 近期熱門文章 >>
PTT職涯區 即時熱門文章
更多 即時熱門文章 >>
‣ 更多 chaichi 的文章
文章代碼(AID): #1L0PzMEg (Biotech)