[討論] NGS中的 "depth"

看板Biotech (生命科學)作者 (drip brew)時間10年前 (2015/03/22 14:17), 10年前編輯推噓3(3014)
留言17則, 5人參與, 最新討論串1/1
大家好 在看"Single-base resolution analysis of active DNA demethylation using methylase-assisted bisulfite sequencing" 這篇paper 期刊: Nature Biotechnology (p.1231~p.1243) 是epigenetic的相關文章 其中看到定序的"depth" 我看不太懂 假如我用high-throughput sequencing 然後又說 sequenced to an average depth of 238X and 307X per cytosine 我實在不懂這depth是什麼意思以及所影響的是...? 這個"depth" 變多或變少又有什麼影響呢? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 111.251.112.120 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1427005079.A.096.html

03/22 14:23, , 1F
序列cover總chromosome/transcriptome幾次
03/22 14:23, 1F

03/22 14:23, , 2F
越高confidence越高 有錢點的會做到1000x
03/22 14:23, 2F
原來阿!! 那請問通常多少以上才是符合統計水準呢? 我怎麼看他有時候才大於等於5或大於等於10... ※ 編輯: yayayoyi (111.251.112.120), 03/22/2015 14:33:59 Ianthegood: 至少都100吧 他都是per cytosine 或per CpGs 這樣來說如果depth >5 樣本數還是很小啊 這樣怎麼說的過去 但這是出自nature的餒 該如何合理化這一切... ※ 編輯: yayayoyi (111.251.118.160), 03/22/2015 19:35:55 ※ 編輯: yayayoyi (111.251.118.160), 03/22/2015 19:36:34

03/22 21:05, , 3F
看的是methylation不是sequence本身的話可能重點不同
03/22 21:05, 3F

03/22 21:24, , 4F
重點的確不同是沒錯但5真的頗少的
03/22 21:24, 4F

03/23 02:09, , 5F
若單一sample很少,但有很多sample都支持,那就還說得過去
03/23 02:09, 5F

03/23 08:39, , 6F
以前單一case上natures的時代,depth會要求高一點;之後WGS
03/23 08:39, 6F

03/23 08:42, , 7F
多case的depth要求反而降低到7,exome或RNAseq會高一些
03/23 08:42, 7F

03/23 08:45, , 8F
因為depth越高,coverage越降,所以看你的目的是偏重那個
03/23 08:45, 8F

03/23 08:51, , 9F
然後疾病樣本品質差異大,所以coverage太嚴格也會減少樣本
03/23 08:51, 9F

03/23 08:59, , 10F
之前同事用FDR檢定每個exome mutation,methyl也適合嗎
03/23 08:59, 10F

03/23 13:18, , 11F
謝b大詳盡解釋 但還是不明白coverage跟depth的差別ˊˋ
03/23 13:18, 11F

03/23 14:12, , 12F
是因為C的修飾是個改變的過程嗎(5mC>5hmC>5fC>5caC)
03/23 14:12, 12F

03/23 21:06, , 13F
coverage跟depth不同文章釋義有可能不一樣
03/23 21:06, 13F

03/23 21:07, , 14F
b大的coverage是指整個基因體 但有些文章的coverage其實
03/23 21:07, 14F

03/23 21:07, , 15F
就是depth的意思 depth通常是指目標片段的重複次數
03/23 21:07, 15F

03/23 21:14, , 16F
大概瞭解了 謝謝大家的幫忙!
03/23 21:14, 16F

03/23 21:15, , 17F
要做到genome-wide,涵蓋率要有代表性,感謝樓上補充
03/23 21:15, 17F
文章代碼(AID): #1L3bwN2M (Biotech)
文章代碼(AID): #1L3bwN2M (Biotech)