[求救] PCR & running gel
想請問各位一個關於 PCR 的問題,
就是我最近想要 clone 一個基因,分成兩段 PCR,
就是先用一組 primers (e.g. pF1 & pR1) PCR 前 1.5kb,
然後用另一組 primers (e.g. pF2 & pR2) PCR 後面 1.5kb,
再把兩個 PCR products 當作 template,用 pF1 & pR2 PCR 全長,
結果跑 gel 後出現照片中紅框框的結果。
http://imgur.com/JiRO3bB

請問這是什麼情況呢?
很久以前做有出現過類似的情形,
記得那時候用 PCR purification 後好像變成 band 不見了,
還是沒改善,一樣卡在 well,有點忘了。
那時候沒找出問題出在哪,
沒想到現在又碰到這個情況,
所以想請問一下有沒有人知道什麼情形下會卡在 well 中,
感謝。
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