[求救] pET24a與pET28a的差別

看板Biotech (生命科學)作者 (太人生了)時間10年前 (2015/04/29 16:07), 編輯推噓2(206)
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實驗作細菌表現病毒蛋白 我製作了蛋白質表現的載體pET24a和28a 在同樣IPTG濃度以及時間下,我的蛋白質都可以被表現出來 但pET40b卻沒有表現 查了一下書,發現28a在N和C端都有histag 而24a只有N端有,其它的差異我看不懂 T7-tag一個有一個沒有 請問以我的實驗需求(拿來打兔子作抗體) 這兩個載體有什麼差異嗎? 而為什麼pET40b卻又表現不出來? -- -- 推 pen88:以前覺得 鬼塚22歲還是處男很好笑 現在我笑不出來 10/19 01:47 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.96.58 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1430294835.A.369.html

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pET40b有DsbC fusion protein
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04/29 23:43, , 2F
28a只有N端His,兩者也都有T7-tag,查書有? 還是pET manual?
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28a是兩端都有His吧
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28a兩端都有his ,his可用來純化 ,你要打兔子蛋白要大
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量表現,所以必需留一個
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40b我沒用過 ,你有沒有確認好primer設計?若接上去產
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生shift就不會表現了
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我想說的是28b才算有C端His,28a的必須修正,因inframe不對
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文章代碼(AID): #1LG94pDf (Biotech)
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