[求救] cryosection-snap freezing法
感謝上次各位版友關於cryosection腦袋厚薄的解答
另外一個問題想請教，
其實本實驗室，老師有教一個比較快速
就可以把組織凍成塊，當天就可以切片的方法，
簡單來說，就是用2-butane，
把它用液態氮，冷到有點凝結，
如文章所言，2-butane的溫度大約會到達-150度
http://tinyurl.com/qdur329 (這文還有用sucrose脫水)
我老闆教我們是完全不需要脫水的，直接斷頸，取組織即可凍
http://tinyurl.com/kbfv22t (像這一篇)
然後快速的把組織(在OCT裡, mold)浸入，
就可以凝成塊。
但是咧，如果凍的好，不會有冰晶。凍不好就很淒慘。
組織到處都是一個洞一個洞，
就我老闆的觀點，要做的好，2-butane一定要夠冷，
要等到2-butane幾乎整個都要凝結，才可以凍組織。
我想問：
凍細胞都要加DMSO防止水成為冰晶，傷害細胞了，為何這個方法，
當整個組織都到達-150度，水怎麼不會變成冰晶？
OCT可以拉出水分子？？
另外，很久以前，我還能成功，拿到漂亮的組織狀態圖。
最近一整個淒慘，骨骼肌、心臟，都會有很嚴重的冰晶
快被我老闆砍死了 QQ
版上，有沒有人也是用這個方法？
有沒有啥眉角？
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