[求救] Western Hy抗體的步驟
先感謝板上AR大對於培養3T3-L1的寶貴建議～
我順利收下細胞最近在做Western Blot
但在Hy抗體的部分大卡關了～
除了reuse 的actin外
其他都一直失敗Q__Q
在猜步驟中可能錯誤的就是Hy抗體的地方了！（我有一次用reuse的PPAR gamma一抗有出現一條有點斜的Band)
我Hy 一抗是使用 5%PBST泡的脫脂奶
抗體跟奶的比例是1：1000
加的方法是先在方形小盒加入5ml 奶
先稍微在盒中晃勻，確定可以覆蓋盒底體積後
在盒中六個點分段加入抗體
（左上 ，中上，右上）
（左下，中下，右下）
加完後就利用Tip在盒底劃勻抗體
（左上斜紋劃到右下，
右上斜紋劃到左下，
上（下）橫紋劃到下（上），
左（右）縱紋劃到右（左））
我試過放4度C冰箱over night 跟一小時…
但都依舊很白Q__Q
二抗也是都一樣的方法，
actin 出來還蠻明顯的，
所以我在猜是不是我Hy一抗的步驟怎麼了？
請各位大大提出意見>_<～
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 118.166.77.143
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1430923890.A.BEF.html
→
05/06 23:04, , 1F
05/06 23:04, 1F
→
05/06 23:06, , 2F
05/06 23:06, 2F
→
05/07 00:27, , 3F
05/07 00:27, 3F
→
05/07 00:27, , 4F
05/07 00:27, 4F
→
05/07 00:27, , 5F
05/07 00:27, 5F
→
05/07 00:27, , 6F
05/07 00:27, 6F
→
05/07 00:27, , 7F
05/07 00:27, 7F
→
05/07 00:27, , 8F
05/07 00:27, 8F
→
05/07 00:27, , 9F
05/07 00:27, 9F
推
05/07 06:25, , 10F
05/07 06:25, 10F
→
05/07 13:21, , 11F
05/07 13:21, 11F
→
05/07 16:41, , 12F
05/07 16:41, 12F
→
05/07 16:42, , 13F
05/07 16:42, 13F
推
05/07 18:11, , 14F
05/07 18:11, 14F
→
05/08 00:32, , 15F
05/08 00:32, 15F
推
05/08 01:20, , 16F
05/08 01:20, 16F
→
05/08 01:21, , 17F
05/08 01:21, 17F
→
05/08 01:21, , 18F
05/08 01:21, 18F
→
05/08 11:43, , 19F
05/08 11:43, 19F
推
05/08 12:24, , 20F
05/08 12:24, 20F
→
05/08 14:26, , 21F
05/08 14:26, 21F
→
05/08 18:59, , 22F
05/08 18:59, 22F
→
05/09 16:18, , 23F
05/09 16:18, 23F
→
05/09 16:19, , 24F
05/09 16:19, 24F
→
05/09 16:20, , 25F
05/09 16:20, 25F
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章
