[求救] EGFP only 代表的意義?

看板Biotech (生命科學)作者 (歐弟)時間10年前 (2015/05/14 14:26), 10年前編輯推噓2(2013)
留言15則, 5人參與, 最新討論串1/1
小弟剛接觸 transfection , 有練習用 confocal 去看 cells 的 protein 運送的情形 有個地方不太了解,EGFP 是個螢光 protein,常會看到某 gene/EGFP 的 plasmid DNA 來 transfection, 意思是要讓某 gene 的量增加,並且有 EGFP 可以追縱, 那麼,一般還會用一個只有 EGFP only 來當 control, 我不了解只單獨 transfection E GFP 時,發螢光的就只是送進 cells 內的 EGFP protein, 這樣的意義是為什麼呢?這樣 從 EGFP only 的 cells 觀察到他綠色螢光不就只是單純的 EGFP 嗎?怎麼跟實驗組比較 ? 能當實驗組的 control 的原因是什麼? 我查了一些簡單的文獻還是不太懂。。。 有人可以指點一下嗎?謝謝。 -- Sent from my Android -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.109.49.20 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1431584799.A.D27.html ※ 編輯: eddieody (140.109.49.20), 05/14/2015 14:32:22

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因為你實驗組裡面也有送EGFP進去,你能保證你的結果不會是
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EGFP造成的嗎?
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要讓細胞間的差異只有你的target protein
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所以除了target以外,實驗組有的對照組都要有
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證明你的結果是送入基因造成 而不是送入EGFP造成
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比如說你把藥溶於DMSO 那你control組就要加DMSO
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所以說假設我treat樣品後
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在confocal 發現某gene /EGPF從他會從細胞質跑到細胞膜
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,那麼 EGFP only 組沒螢光大部分都還在細胞質內,所以
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代表是那個 gene 是確時在treat 後有這樣的能力對吧?
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※ 編輯: eddieody (140.109.49.20), 05/14/2015 18:50:26

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yes
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05/15 09:19, , 13F
感謝各位的解答
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另外還有當 transfection efficiency 的指標——如果你的實
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驗組 plasmid 上没有 EGFP gene 的話。
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文章代碼(AID): #1LL40Vqd (Biotech)
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