[求救] 以染GUS法染菌確認有無轉型成功
大家好 小弟最近實驗室遇到轉植株相關問題
想問一下有沒有人有直接對E. coli染GUS (B-glucuronidase) 過?
可否用這種方式確認有無轉型成功呢?
雖然我知道E. coli本身就帶有gus gene,
所以不管有沒有吃目標基因,都會有gus反應出現
但有沒有品系(或廠牌)的勝任細胞可特別針對外援轉入的gus基因
做轉型成功確認呢?
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BTW,以前學生物技術時就有遇到這個問題過
http://juang.bst.ntu.edu.tw/BCT/Chapters/Chap2-2.htm
a. 前一天進行轉形後,為何不直接將菌液塗抹在含有 IPTG 的培養基?
b. gus 基因原本就存在 E. coli 中,難道宿主菌株不會產生 GUS?
想看看大家的經驗
發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等)之分讓,
請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作或 簽署材料分讓協議(MTA),否則版工將逕行刪除
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