[求救] 循環腫瘤細胞螢光

看板Biotech (生命科學)作者yu12ling06 (ling)時間9年前 (2015/11/11 14:02)推噓3(3推 0噓 1→)

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各位版上高手大家好 Lab進行循環腫瘤細胞分離與染色的實驗，發現一個不知道怎麼解釋的情況：先說明一下作法：利用儀器從全血中將血球細胞與循環腫瘤細胞分離後儀器會自動進行染色（CD45, EpCAM, CK, DAPI)並收集在chip中白血球細胞會呈現：CD45+, DAPI+ EpCAM-, CK-; 循環腫瘤細胞則會呈現：CD45-, DAPI+ EpCAM+, CK+ 目前遇到的情況是，染色完立即進行顯微鏡拍攝，所觀察到的循環腫瘤細胞與白血球細胞的螢光都較微弱，但chip在經一二個星期避光保存後再拿出來拍攝，會發現循環腫瘤細胞與白血球細胞的螢光都明顯增強，尤其是循環腫瘤細胞的螢光較實驗完立即拍攝強上幾百倍就過去在實驗室的經驗，螢光應該會是慢慢decade，還沒遇到越來越強的現象目前推測 1. Chip中有EpCAM, CK, CD45螢光抗體殘留？ 2. 雖然經儀器分離, chip中仍有許多紅血球殘留, 而遮蔽了螢光, 隨著紅血球被用來固定的福馬林lysis, 遮蔽逐漸消失？請問大家有什麼看法？會是什麼原因造成的？（苦惱中） -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 114.136.134.110 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1447221748.A.728.html