[求救] 有關質體定序
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等）之分讓，
請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作或 簽署材料分讓協議(MTA)，否則版工將逕行刪除
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有關質體的定序問題
我是用pUC18作為載體，
送入一段約1.1K的序列。
以BamHI/EcoRI作為切位，
過程中都有跑膠切膠純化。
定序之後結果都有很多不同的點突變產生，
後來也將原本的pUC18送去定序，
利用其質體上M13F-40與M13R-48去定序。
兩者中間為MCS片段，
與原本的pUC18序列比對，
發現在465位置上少了一個G，
1062位置的A變成了T。
http://imgur.com/C9iLMBN
這是否代表了我的pUC18是確定有問題的。
也造成了質體是否會影響細菌不正常生長的可能性?
而我也有做藍白篩篩選，
在DH5a下送入pUC18 的確會產生藍斑的。
請求各位幫助了。
邁入碩班的第三年了...
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