[求救] 螢光蛋白fusion protein 表現
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等）之分讓，
請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作或 簽署材料分讓協議(MTA)，否則版工將逕行刪除
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各位大大好
我最近在試圖接一段fusion protein，預計將mCherry接在我要表現的A protein的N端
一開始之所以會決定接在N端是因為有PAPER將RFP接在A protein的N端，所以才打算
照做。我的mCherry與A protein中間有間隔約10個胺基酸。有確定in-frame。
但接完之後送細胞→收cell lysate並以mCherry抗體卻沒有東西T_T倒是單純mCherry
表現載體則是有band的。收protein之前看螢光，fusion protein也是沒有亮，而單純
表現mCherry則有發光。
當初接好後因為A protein大小過大(3399bp)所以沒定序就直接送細胞測試了。
想請問大家的意見@@"因為我不確定這樣的fusion protein是不是太大了才導致整個蛋
白表現瓦解?
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