[討論] small RNA enrichment的萃取問題
各位前輩好
想請教各位一個問題
市面上賣的核酸萃取套組抽取miRNA的部分
大多都是利用液相萃取後的上層液放入spin column去binding
在做small RNA enrichment 的程序時
先加入少量的酒精binding分離 large RNA
取濾出液後加入量較大的酒精binding上 spin column後wash 再elution
想問分離large RNA 時 為什麼 large RNA會被binding住，而小的不會呢?
我這裡想到就是利用酒精對片段大小RNA的沉澱效率不同，被過濾掉
或是大小片段的RNA對silica surface 的 affinity不一樣
但後者遲遲想不出合理解釋呢
想問其中的真正機制是如何? 查過protocol都只說large RNA會被" immobilize"
在spin column 上 相關的機制我還是不太清楚
謝謝各位指教
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