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[求救] 關於western blot native gel 的問題

看板Biotech (生命科學)作者 (sunny)時間7年前 (2017/12/26 17:23), 編輯推噓2(2推 0噓 23→)
留言25則, 6人參與, 8年前最新討論串1/1
最近要跑native gel 因為以前都是跑denature gel 沒有跑過這種的 想問板上有人知道native gel的配方嗎? 我知道是沒加SDS和sample 不用煮 那我想問在作法上還有什麼不一樣嗎? 因為我在網路上查就只是少了SDS 可是怎麼上膠和下膠的tris的PH值一樣 難道native沒分上下嗎? 所以想請板上的好心人是否有配方? 以及配方的來源 感激不盡 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 122.117.114.207 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1514280210.A.DA1.html
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12/26 20:15, 7年前 , 1F
native根據你想分的dimension也有很多種喔 最常見的大
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12/26 20:15, 7年前 , 2F
概是blue native page
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12/26 21:03, 7年前 , 3F
你好 我是在網路上這個地方看到這樣的配方,那這是P
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12/26 21:07, 7年前 , 4F
他的配方就是跟SDS一樣 只是少了SDS,但是她的上下膠
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12/26 21:08, 7年前 , 5F
但是她的上下膠的tris的PH值都一樣 想問這是為什麼
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12/26 21:09, 7年前 , 6F
還有這樣的話 這是屬於你說的那種BN page嗎?
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12/26 21:12, 7年前 , 7F
12/26 21:12, 7F
推
12/27 09:01, 7年前 , 8F
點進去沒有東西耶
12/27 09:01, 8F
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12/27 09:01, 7年前 , 9F
另外 marker要重買
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12/27 10:12, 7年前 , 10F
呃 因為留言的字數有限 我不知道要怎麼貼完整的網
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12/27 10:13, 7年前 , 11F
那上下膠的PH值會不一樣嗎?
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12/28 10:38, 7年前 , 12F
native就同I大說的有很多種，不過我覺得你還是要弄清楚
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12/28 10:39, 7年前 , 13F
為什麼SDS PAGE的上下膠PH不一樣的原因是甚麼
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12/28 10:41, 7年前 , 14F
另外可以用縮網址的網站，例如 https://goo.gl/
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12/28 16:14, 7年前 , 15F
而且要做 western blot 的話，還要考慮到抗體能不能
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12/28 16:14, 7年前 , 16F
辨認"native"下的蛋白質。如同樓上大師們的分享，
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12/28 16:15, 7年前 , 17F
可能要先確定到底想要研究什麼問題。
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12/28 23:03, 7年前 , 18F
謝謝樓上的各位
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12/28 23:04, 7年前 , 19F
https://goo.gl/X26GiK這個是我在網路上查到的配方
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推
01/27 02:13, 8年前 , 20F
我之前做過 native page有分上下膠，但是Tris PH值
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01/27 02:13, 8年前 , 21F
都是8.8 但是其他溶液的比例不一樣。SDS PAGE上面是
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01/27 02:13, 8年前 , 22F
用6.8是因為讓glycine帶正電，與tris帶的電性不同，
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所以可以擠壓sample，讓他從同一個起跑點出發，但是
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native page是為了保有蛋白原來的結構，不能受到擠
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01/27 02:13, 8年前 , 25F
壓，所以結論是有分上下膠，但是Tris皆為PH8.8
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