PTT職涯區 / Biotech (生命科學)

[求救] 固定劑為何會造成自體螢光

看板Biotech (生命科學)作者 (自由2015)時間7年前 (2018/04/21 21:18), 7年前編輯推噓3(3推 0噓 15→)
留言18則, 5人參與, 7年前最新討論串1/1
各位前輩好 小弟最近做實驗被問到一個問題 為何像是戊二醛、多聚甲醛這類的固定劑會造成自體螢光呢？ 小弟不才 我只知道自體螢光可以用來區分螢光標記的光阿…QQ 希望有大大能幫小弟開示一下 感激不盡 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 27.105.31.105 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1524316713.A.876.html
推
04/21 21:35, 7年前 , 1F
因為這些化學物質有螢光阿....
04/21 21:35, 1F
→
04/21 21:35, 7年前 , 2F
會吸收特定波長 放出特定波長 剛好又落在我們要看的
04/21 21:35, 2F
→
04/21 21:35, 7年前 , 3F
地方 就是自體螢光 其他波段愛怎麼吸光放光無所謂啦
04/21 21:35, 3F
感謝大大講解！我瞭解了 ※ 編輯: freedom2105 (27.105.31.105), 04/21/2018 21:38:23
推
04/24 22:04, 7年前 , 4F
paraformaldehyde不是固定劑，要解離以後變成甲醛才是
04/24 22:04, 4F
→
04/24 22:06, 7年前 , 5F
通常glutaraldehyde會造成被固定的組織產生自體螢光
04/24 22:06, 5F
→
04/24 22:07, 7年前 , 6F
但是formaldehyde比較不會
04/24 22:07, 6F
→
04/24 22:12, 7年前 , 7F
自體螢光來自醛基，用glycine耗掉醛基可減少自體螢光
04/24 22:12, 7F
→
04/25 02:16, 7年前 , 8F
近期看了一篇ms spec的研究 tris比glycine好用喔
04/25 02:16, 8F
→
04/25 14:12, 7年前 , 9F
樓上，用 Tris 太強也不見得是好事，我有次嘗試用 Tris
04/25 14:12, 9F
→
04/25 14:12, 7年前 , 10F
quench 結果造成 fixation 失敗.....
04/25 14:12, 10F
→
04/25 14:17, 7年前 , 11F
我都不做quench....XD 真的會有差嗎?
04/25 14:17, 11F
→
04/25 14:17, 7年前 , 12F
比如讓弱的抗體訊號強一點之類的
04/25 14:17, 12F
推
04/25 18:03, 7年前 , 13F
應該是背景會降低
04/25 18:03, 13F
→
04/25 18:03, 7年前 , 14F
雖然有次忘記 quench看起來沒差，不過那是過表現的蛋
04/25 18:03, 14F
→
04/25 18:03, 7年前 , 15F
白
04/25 18:03, 15F
→
04/25 18:40, 7年前 , 16F
我個人是覺得 PBS 洗幾次 free 的 formaldehyde 就被稀
04/25 18:40, 16F
→
04/25 18:41, 7年前 , 17F
釋掉了，有沒有 quench 沒差，我做細胞免疫螢光染色也
04/25 18:41, 17F
→
04/25 18:42, 7年前 , 18F
都沒有在 quench 的
04/25 18:42, 18F
‣ 更多 freedom2105 的文章
文章代碼(AID): #1QspefXs (Biotech)
Biotech 近期熱門文章
更多 近期熱門文章 >>
PTT職涯區 即時熱門文章
更多 即時熱門文章 >>
‣ 更多 freedom2105 的文章
文章代碼(AID): #1QspefXs (Biotech)