[閒聊] 以CRISPR/Cas9探討TFBS可調控基因表現

看板Biotech (生命科學)作者 ( )時間6年前 (2018/09/03 09:59), 編輯推噓0(004)
留言4則, 2人參與, 6年前最新討論串1/1
傳統上探討某基因的鄰近序列是否會調控該基因表現 最簡單的應該是操作reporter assay透過deletion/mutation觀察變化吧? 如果感興趣的序列與基因的距離超過某個範圍(例如>10kb)時 常常會是reporter的值(或差異)偏低也不好比較 就算有變化,也無法證明就是影響目標基因 而且要說服別人有這麼遠(>10kb)還能調控也不容易 目前看起來CRISPR/Cas9應該適合用在這方面的實驗 透過knock-out來證明一段很遠的TFBS motif會影響目標基因的變化 只是建立CRISPR/Cas9 clone遠比luciferase assay耗時間 不知道有人看過實際驗證類似這種遠端調控的距離,會有多遠? 或者還有其他方法可以驗證類似的基因調控存在,而不僅是3C的接觸 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.109.40.29 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1535939979.A.1D4.html

09/14 06:59, 6年前 , 1F
ZRS 距離目標 Shh 差不多有 1Mb,應該是研究最清楚的遠
09/14 06:59, 1F

09/14 07:00, 6年前 , 2F
距 enhancer 之一。動物實驗的 point mutation / knock
09/14 07:00, 2F

09/14 07:00, 6年前 , 3F
out / xenosequence knock in 都有文章做過。
09/14 07:00, 3F

09/14 14:29, 6年前 , 4F
1Mb....好遠阿
09/14 14:29, 4F
文章代碼(AID): #1RZ9MB7K (Biotech)
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