Re: [求救] FPLC pressure fluctuations
※ 引述《yayayoyi (drip brew)》之銘言：
: 最近用AKTA FPLC時，
: 由於管柱壓力有點提高，
: 想說可能有些蛋白卡在裡面，
: 於是就用0.5M NaOH 0.5ml/ml洗一下(之前用同樣方式洗過)
: 結果壓力就開始很不穩...
: 如下圖
: https://i.imgur.com/ABWCVI3.jpg
: 現在正在用水洗，但由於管柱壓力慢慢的在上升...
: 導致在洗的時候一直overpressure
: 原本速度1.5ml/min
: 現在降到0.5ml/min...
: 誰來救救一下是那裡出問題了為何壓力會一直上下波動
: pump進空氣？還是那個吸buffer的閥怎麼了嗎…
: 要如何排除呢？
: 不然就是要聯絡HE的廠商了...
: 感謝各位前輩~
先講結論
管柱已經沒救了，建議換一隻新的管柱
管柱拿下來以後，先把管線裡的液體置換成水
接著去找一個東西叫做purge kit，它看起來像是一個針筒接著一段矽膠管，矽膠管的尖
端會有一個接頭。
你用的機器叫做AKTA Prime plus
在機器正前方有個看起來像是六遍型的pump head
Pump head上應該有一個可以用手轉開的接頭
不知道是哪個頭的話，試著把它轉開，應該會滴水出來。
接著把purge kit的接頭接上pump head的接頭。開始抽吸pump裡的液體。大概吸個50ml左
右。然後把pump head的接頭鎖緊。
之後設定B%=50, flow rate 20, 3 min
結束後改成B%=0, flow rate 2
UV應該就恢復正常了。
如果沒正常。打機器上的0800電話去叫修
Pump 壓力有波動是正常的。因為你的間隔是規律的，但可能機器久了波動很明顯。
你的root cause在於：
肯定進了空氣，比較可能是inlet端進去的。因為你的導電值並未隨著鹼性溶液的進入而
升高，反而下降。這只有兩種可能：
1. 你打水
2. 你打了空氣
從UV的振幅跟頻率來看應該是2
另外一件事很重要說三次：
不要逆洗
不要逆洗
不要逆洗
逆洗不是不行。而是大部分的人會誤判逆洗的使用時機。這只會造成更嚴重的後果跟麻煩
。
以上隔空抓藥，請不吝賜教
另外製造商是GE
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