[求救] 抽genomic DNA無法去除RNA contamination
想請問我抽DNA phenol-chlorform extraction 又 EtOH precipitation完後
無論是用ddH2O或TE buffer 回溶
加入RNase A (1 mg/ml) 後都會出現一些白色棉絮樣無法溶開的沈澱物
屢試不爽
37度兩小時做用完後，phenol-chloroform extraction時
這些沈澱物會存在interphase
取水層進行EtOH precipitation，最後回溶在ddH2O
Nanodrop 260/280, 260/230都很漂亮，都在2左右
但將Nanodrop的值跟Qubit assay相比發現有嚴重的RNA contamination
Nanodrop/Qubit > 10以上
想請問RNase A treatment的消率有多好？
有可能因為RNA量過高導致RNase A digest不完嗎？
還是有什麼可能的原因造成RNase被抑制？
因為照著protocol做，其他人都沒有RNA污染的問題，但我暫時也想不出哪裡有問題
還請大家幫忙解惑
謝謝！
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