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討論串[問題] SDS-PAGE stacking gel一直不凝
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#1
[問題] SDS-PAGE stacking gel一直不凝
推噓4(4推 0噓 2→)留言6則，0人參與, 最新作者chiasaiqueen (其實是水桶腰)時間19年前 (2006/03/22 02:45), 編輯資訊
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昨天我做片SDS-PAGE, seperating gel很快就凝了(約30 min)，. 然後做stacking gel的時候，卻死都不凝，做了4次，4次都一樣，. 甚至連well底都不凝，但是剩下來放在tube的卻全都凝了；. 我懷疑是沒有mix好，但是我做的步驟如下：. 加水、acrylami
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#2
Re: [問題] SDS-PAGE stacking gel一直不凝
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者aggaci (好想學鋼琴阿!(學陶笛中))時間19年前 (2006/03/22 13:53), 編輯資訊
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歐. 我的作法是TEMED加原來的3~4倍. Stacking那層TEMED加多不會怎樣. 但是separation那層得照步驟來. --. http://0rz.net/da0PG 我的相簿..... --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 140.114.100.1
#3
Re: [問題] SDS-PAGE stacking gel一直不凝
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者HAYATO (我不是梁朝偉)時間19年前 (2006/03/22 21:46), 編輯資訊
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※ 引述《aggaci (好想學鋼琴阿!(學陶笛中))》之銘言：. 我的經驗是APS加濃一點會凝比較快. 譬如說0.01克溶於100ul的水改成0.02或是0.05甚至0.1. 可以試試看. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 218.167.203.237.
#4
Re: [問題] SDS-PAGE stacking gel一直不凝
推噓3(3推 0噓 2→)留言5則，0人參與, 最新作者enisx (小日本真厲害...)時間19年前 (2006/03/22 21:52), 編輯資訊
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我個人覺得你重新配一管新的APS可能比較好，. 我們實驗室都用10% APS (配30-45mL 4度冰箱存放)。. 一般我作PAGE gel 11cm的兩片我會用到大概：. ～15mL 的 separation gel sol. （我會用120uL的10% APS; 12uL的TEMED). ～7
#5
Re: [問題] SDS-PAGE stacking gel一直不凝
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者dee.時間19年前 (2006/03/25 03:06), 編輯資訊
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※ 引述《chiasaiqueen.bbs@ptt.cc (其實是水桶腰)》之銘言：. 遇到這種狀況真的是滿無奈的…. sample都弄好了…就是膠搞不凝…真是見鬼了！！. 這種時候我就是自認倒楣再做一片，然後加double的aps，. 不過我的狀況是連剩下留在tube裡的膠也不凝耶…後來也確定是a
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