Re: [問題] SDS-PAGE stacking gel一直不凝
看板Biotech (生命科學)作者aggaci (好想學鋼琴阿!(學陶笛中))時間19年前 (2006/03/22 13:53)推噓0(0推 0噓 0→)留言0則, 0人參與討論串2/5 (看更多)
※ 引述《chiasaiqueen (其實是水桶腰)》之銘言：
: 昨天我做片SDS-PAGE, seperating gel很快就凝了(約30 min)，
: 然後做stacking gel的時候，卻死都不凝，做了4次，4次都一樣，
: 甚至連well底都不凝，但是剩下來放在tube的卻全都凝了；
: 我懷疑是沒有mix好，但是我做的步驟如下：
: 加水、acrylamide/bis-acrylamids、tris buffer、SDS
: -> vortex, spin down
: ->加APS
: -> vortex, spin down
: ->加TEMED
: -> vortex, spin down
: 我想應該不是reagent的問題，因為我seperating gel用的都是同樣的reagent，
: (除了tris buffer>
: 而且tube裡的都凝了…
: 請問版上的大大們有類似經驗嗎?可能是什麼問題?
: APS應該不會在一瞬間壞掉吧…
: 以前從來沒有過這種經驗…
歐
我的作法是TEMED加原來的3~4倍
Stacking那層TEMED加多不會怎樣
但是separation那層得照步驟來
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http://0rz.net/da0PG 我的相簿....
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