[問題] SDS-PAGE stacking gel一直不凝

看板Biotech (生命科學)作者 (其實是水桶腰)時間19年前 (2006/03/22 02:45), 編輯推噓4(402)
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昨天我做片SDS-PAGE, seperating gel很快就凝了(約30 min), 然後做stacking gel的時候,卻死都不凝,做了4次,4次都一樣, 甚至連well底都不凝,但是剩下來放在tube的卻全都凝了; 我懷疑是沒有mix好,但是我做的步驟如下: 加水、acrylamide/bis-acrylamids、tris buffer、SDS -> vortex, spin down ->加APS -> vortex, spin down ->加TEMED -> vortex, spin down 我想應該不是reagent的問題,因為我seperating gel用的都是同樣的reagent, (除了tris buffer> 而且tube裡的都凝了… 請問版上的大大們有類似經驗嗎?可能是什麼問題? APS應該不會在一瞬間壞掉吧… 以前從來沒有過這種經驗… -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 220.137.91.49

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不需要vortex吧...我曾因為用vortex而膠不凝
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改用倒轉tube來mix就沒在發生過膠不凝的狀況
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不過你說tube裡剩下的都有凝.那可能又跟我的情況不同
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我是vortex mix後,連tube裡的都不凝
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接觸空氣會比較慢凝
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抽真空!試試看!
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文章代碼(AID): #1484cmuG (Biotech)
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