[問題] SDS-PAGE stacking gel一直不凝
昨天我做片SDS-PAGE, seperating gel很快就凝了(約30 min),
然後做stacking gel的時候,卻死都不凝,做了4次,4次都一樣,
甚至連well底都不凝,但是剩下來放在tube的卻全都凝了;
我懷疑是沒有mix好,但是我做的步驟如下:
加水、acrylamide/bis-acrylamids、tris buffer、SDS
-> vortex, spin down
->加APS
-> vortex, spin down
->加TEMED
-> vortex, spin down
我想應該不是reagent的問題,因為我seperating gel用的都是同樣的reagent,
(除了tris buffer>
而且tube裡的都凝了…
請問版上的大大們有類似經驗嗎?可能是什麼問題?
APS應該不會在一瞬間壞掉吧…
以前從來沒有過這種經驗…
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