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請問關於EMSA的問題
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#8
Re: 請問關於EMSA的問題
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作者
chococracker
(巧克力餅乾)
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19年前
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(2006/09/13 13:30)
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我做EMSA的時候並不會把dye加到protein-DNA的sample裡面耶. 而是僅把dye load到其他的lane當標示膠跑的位置用. 可是我並沒有碰到isotope-label的DNA漂浮起來的問題. 所以我想沒加dye還是可以沉下去的. --.
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#7
Re: 請問關於EMSA的問題
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作者
phenol
( 更~~~跑哪去)
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19年前
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(2006/09/12 14:54)
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所以所以所以就是 直接 把protein-DNA的 mixing load到well裡面就可以了嗎??. 真的 太好了 快誰來回答我 任何一個人跟我說好 我就放心了 就好了. 快來人阿~~~. --. 有些事情 不知道 是幸福的. 你說呢 ?. --.
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#6
Re: 請問關於EMSA的問題
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作者
aggaci
(有氣質的台客)
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19年前
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(2006/05/29 01:00)
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歐! 這個我這幾天有做. 的確,在well裡的抗數比之前少許多. 可以沉下去啦,安啦. 指不過有個風險是很怕load錯,畢竟沒顏色. 不過今天跑出個奇怪的DATA. 昨天重新label我的probe. 想說來測試看看. 過gil filtration後,抗數超強(超過2000抗). binding完
(還有286個字)
#5
Re: 請問關於EMSA的問題
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作者
azm590
(azm590)
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19年前
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(2006/05/29 00:38)
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當然可以不加dye. 至少我就是這樣做的. cloning book 中就有建議只有no protein control才加dye. 不過loading時要小心一點 有一種輔助loading的塑膠塊(我不知道他實際的名稱). 建議同時使用. --.
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#4
Re: 請問關於EMSA的問題
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作者
indie
(band of brothers)
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19年前
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(2006/05/28 23:19)
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我最近跑的感覺是加了dye以後. protein會沉澱 並且卡在well裡面 (可以看到明顯的particle). 所以有在考慮不加dye loading. 可是我很懷疑 不加dye loading. DNA會不會沉不下去?. 我用的是polyacrylamide 的膠 (直立式電泳槽). 不知道有
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