Re: 請問關於EMSA的問題
看板Biotech (生命科學)作者indie (band of brothers)時間19年前 (2006/05/28 23:19)推噓0(0推 0噓 0→)留言0則, 0人參與討論串4/8 (看更多)
※ 引述《aggaci (有氣質的台客)》之銘言：
: ※ 引述《erised (除了我以外都很好)》之銘言：
: : 我試過10x和100x (molar ratio)
: : 100x的效果就比較好
: : 可以看到specific band被compete掉
: : 另外我也有同時和mutant site contained probe的competition比較
: : 結果即使用100x那個specific band也不會被compete掉
: : 不過我沒有用kit是用傳統的isotope label的
: : hot probe量只是大概估計 不是很精準的量
: : 但是我的cold probe (wt和mut) 量是加入一樣的
: 再請問您一下
: 請問您的mixture要loading時，有加dye嗎?
: 因為我不只在一個地方看到不加dye loading
: 於另一個well只加dye以便看跑到什麼地方...
: 為什麼呢?
我最近跑的感覺是加了dye以後
protein會沉澱 並且卡在well裡面 (可以看到明顯的particle)
所以有在考慮不加dye loading
可是我很懷疑 不加dye loading
DNA會不會沉不下去?
我用的是polyacrylamide 的膠 (直立式電泳槽)
不知道有沒有先進有load過不加dye的DNA呢??
可以跑嗎?
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