Re: 請問關於EMSA的問題
※ 引述《erised (除了我以外都很好)》之銘言:
: ※ 引述《aggaci (有氣質的台客)》之銘言:
: : 請問你(妳)們pre-binding時cold probe都是labeled probe的幾倍?
: : 有無做過neagative control呢?
: : 之前一直做不出來 火大了,pre-binding給他來個200倍
: : 結果是什麼都競爭掉了,連neagative control都競爭掉了(一定不會binding的那組)
: 我試過10x和100x (molar ratio)
: 100x的效果就比較好
: 可以看到specific band被compete掉
: 另外我也有同時和mutant site contained probe的competition比較
: 結果即使用100x那個specific band也不會被compete掉
: 不過我沒有用kit是用傳統的isotope label的
: hot probe量只是大概估計 不是很精準的量
: 但是我的cold probe (wt和mut) 量是加入一樣的
再請問您一下
請問您的mixture要loading時,有加dye嗎?
因為我不只在一個地方看到不加dye loading
於另一個well只加dye以便看跑到什麼地方...
為什麼呢?
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http://0rz.net/da0PG 我的相簿....
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◆ From: 140.114.100.165
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