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討論串[問題] 請教各位先進E. coli表現與 SDS-page的 …
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#5
Re: [問題] 請教各位先進E. coli表現與 SDS-page的 …
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者longy (longy)時間19年前 (2006/06/22 00:20), 編輯資訊
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抱歉!. 漏打了. 我用urea在跑膠前也是要離心. 再取上清液跑. 不然膠會跑的很怪. --. █◤◣ █◤█ █◣█ █◤◣ █ █◤◣ █◤█ ╭═════════╮. █ █ █ █ █◥█ █◢█ █ █ █ █ █ ＢＲＡＺＩＬ 2006. █◢◤ █ █ █ █ █◤█ █ █ █ █
#4
Re: [問題] 請教各位先進E. coli表現與 SDS-page的 …
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者aggaci (有氣質的台客)時間19年前 (2006/06/21 22:55), 編輯資訊
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用G-HCl時，跑電泳前得先沉澱. 否則不能跑. --. http://0rz.net/da0PG 我的相簿..... --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 140.114.100.165.
#3
Re: [問題] 請教各位先進E. coli表現與 SDS-page的 …
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者kayle (kayle)時間19年前 (2006/06/21 22:37), 編輯資訊
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有可能沒有生成 不知你的protein對細菌有沒有傷害. induction條件下 細菌的生長會稍慢 可是如果很慢的話 可能就有問題. 你用的vector (我沒查)應該不是secrete的吧. 應該細胞的碎片. 可以, Sample buffer中的SDS 2-ME可以將inclusion bod
(還有20個字)
#2
Re: [問題] 請教各位先進E. coli表現與 SDS-page的 …
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者wensing (潛力股)時間19年前 (2006/06/21 16:19), 編輯資訊
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感謝分享！. 我的蛋白質很特別，可以耐得住urea而不變性. 那用Gu-HCl可以嗎？ 會影電泳結果嗎？. 我的sample buffer 就一般的成分，SDS, β-me. --. wensing (ptt) = eular (kkcity). --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc).
#1
Re: [問題] 請教各位先進E. coli表現與 SDS-page的 …
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者longy (longy)時間19年前 (2006/06/21 13:11), 編輯資訊
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分享一下我的經驗. 表現蛋白的部份應該是都差不多. 但是在跑膠時. 我會先離心(把菌離下來). 然後加8M urea去破菌. (回溶菌泥後有可能澄清也有可能渾濁 視菌量而定). 加熱到90度 10至20分鐘 跑膠. 可以看出有沒有表現. 但是不能知道是否是inclusion body. 白白的東西應
(還有200個字)
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