Re: [問題] 請教各位先進E. coli表現與 SDS-page的 …

看板Biotech (生命科學)作者 (有氣質的台客)時間19年前 (2006/06/21 22:55), 編輯推噓0(000)
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※ 引述《wensing (潛力股)》之銘言: : 感謝分享! : : 分享一下我的經驗 : : 表現蛋白的部份應該是都差不多 : : 但是在跑膠時 : : 我會先離心(把菌離下來) : : 然後加8M urea去破菌 : 我的蛋白質很特別,可以耐得住urea而不變性 : 那用Gu-HCl可以嗎? 會影電泳結果嗎? 用G-HCl時,跑電泳前得先沉澱 否則不能跑 : : (回溶菌泥後有可能澄清也有可能渾濁 視菌量而定) : : 加熱到90度 10至20分鐘 跑膠 : : 可以看出有沒有表現 : : 但是不能知道是否是inclusion body : : 白白的東西應該是菌的殘骸 : : 你sample buffer中有什麼成分? : 我的sample buffer 就一般的成分,SDS, β-me : : 如果只是SDS應該不足以完全破壞inclusion body : : (上面這句話是我據經驗推測 有錯請糾正 感謝~~^^") -- http://0rz.net/da0PG 我的相簿.... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.100.165
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