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[ Biotech ]
討論串[問題] Real-Time的問題(也有PCR的問題)
共 5 篇文章
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> 我有作定性與定量的PCR. > 現在我的問題是以結果顯示定性結果有汙染 (no-template 有條帶). > 但是定量的 no template 卻無偵測到螢光反應 (25 copy 大概 37.x CT). > 他們共通的部份是Q水 primer 共通使用的平台 微量吸管跟 tip. >
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您好. 想請教您一些問題. 我有作定性與定量的PCR. 現在我的問題是以結果顯示定性結果有汙染 (no-template 有條帶). 但是定量的 no template 卻無偵測到螢光反應 (25 copy 大概 37.x CT). 他們共通的部份是Q水 primer 共通使用的平台 微量吸管跟 t
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嗯...你說的這個情況我想暫時是可以排除的. 我使用的是ABI原廠8tubes per strip. 蓋上caps時也是用它專用的黑棒棒(不知道這個叫什麼^^"). 所以密封度我想是沒問題的. 另外我忘了提到. 原本都做的出來的real-time，開始出現問題後. 我repeat了好幾次都一直出現相
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^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^. 不是single band的話. 我會懷疑你的PCR已經有contamination的現象了. 是否有的plate/tube沒有封好,在高溫的情況下PCR產物隨著蒸氣飄散在block. 然後又跑到你的
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原本我的real-time一直都做的好好的. 結果自從有一次跑出來的Ct值忽然很低. 之前都在28-30之間. 那一次突然變成20上下. 我就把real-time的產物拿去跑膠看看是哪裡有問題. 跑出來的結果發現產物竟然不是single band.... 可是當初作real-time之前已經用一般的
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