Re: [問題] Real-Time的問題(也有PCR的問題)
> 我有作定性與定量的PCR
> 現在我的問題是以結果顯示定性結果有汙染 (no-template 有條帶)
> 但是定量的 no template 卻無偵測到螢光反應 (25 copy 大概 37.x CT)
> 他們共通的部份是Q水 primer 共通使用的平台 微量吸管跟 tip
> 而發現污染後我 reagent 全部換新的
> 仍然在 no template 有條帶
> 主要的問題是想問...70~75度酒精能滅除污染源嗎?? (DNA跟PCR product)
> 我曾經以稀釋的漂白水浸泡微量吸管的頭與擦操作平台
> 也將微量吸管的頭滅菌過
> 皆沒辦法根絕污染
> (曾經故意將Q水加入微量PCR產物在滅菌,仍然做的出條帶 = =)
> 我的PCR產物大多 70~150 bp...猜測短的產物比較難破壞?
> 沒試過酒精不知道效果如何
> 另外,如果 no template 被"未抽取DNA的植物組織"污染
> 不知道做不做的出條帶 (想請問您)
你的問題有點複雜
建議你先檢查儀器是否正常
儀器本身是否有汙染
(跑空的)
尤其是已經使用過一陣子的儀器
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※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
◆ From: 61-59-139-151.adsl.static.seed.net.tw
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