Re: [問題] Real-Time的問題(也有PCR的問題)
您好
想請教您一些問題
我有作定性與定量的PCR
現在我的問題是以結果顯示定性結果有汙染 (no-template 有條帶)
但是定量的 no template 卻無偵測到螢光反應 (25 copy 大概 37.x CT)
他們共通的部份是Q水 primer 共通使用的平台 微量吸管跟 tip
而發現污染後我 reagent 全部換新的
仍然在 no template 有條帶
主要的問題是想問...70~75度酒精能滅除污染源嗎?? (DNA跟PCR product)
我曾經以稀釋的漂白水浸泡微量吸管的頭與擦操作平台
也將微量吸管的頭滅菌過
皆沒辦法根絕污染
(曾經故意將Q水加入微量PCR產物在滅菌,仍然做的出條帶 = =)
我的PCR產物大多 70~150 bp...猜測短的產物比較難破壞?
沒試過酒精不知道效果如何
另外,如果 no template 被"未抽取DNA的植物組織"污染
不知道做不做的出條帶 (想請問您)
想問問你找出汙染源跟滅除污染的心得 > <
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◆ From: 140.112.74.11
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