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討論串[問題] cloning & TA cloning
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#4
Re: [問題] cloning & TA cloning
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者hurp (修身齊家治國賺大錢)時間19年前 (2006/11/18 16:04), 編輯資訊
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兩個RE site重疊...應該是不容易切成功的..因為RE除了本身辨認的site之外,. 還需要旁邊幾個延伸的bases當墊腳的...如果我從NEB的書上看圖說故事所得到. 的資訊沒錯的話.. 要不要重新設計一端的primer呢? 找不要靠那麼近的RE site...如果vector上. 有的話啦
#3
Re: [問題] cloning & TA cloning
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者Mouseking (叫我老鼠王....-_-)時間19年前 (2006/11/17 22:16), 編輯資訊
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個人推薦invitrogene Topo啦.....不過貴一點. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 210.58.54.177.
#2
Re: [問題] cloning & TA cloning
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者Mouseking (叫我老鼠王....-_-)時間19年前 (2006/11/17 22:04), 編輯資訊
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2.8k確實不好接....我上一個用了2個多月....很慘. 我後來也是先進TA vector 再去切plasmid eluted...才成功的. 你的考量是正確的. 我幫你查了一下EcoRI沒問題.....但SmaI 如果左右 兩個Base切兩小時的效率是10%. 建議你先切SmaI heat i
#1
[問題] cloning & TA cloning
推噓9(9推 0噓 6→)留言15則，0人參與, 最新作者Katoh (人工智慧)時間19年前 (2006/11/15 23:08), 編輯資訊
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版上的高手大家好 有問題想請教大家. 我的insert是primer有設計RE的PCR product(2.8k). 質體是pGEX-2TK(4.9k). 這陣子做cloning試了好幾次. (兩種RE insert跟plasmid分別各切4hr後. 用gel extraction分別純化後在lig
(還有338個字)
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