討論串(共4篇) - [問題] fusion protein的純化 - 看板Biotech

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者yffurdyeknom (Unhurried Justice)時間19年前 (2007/02/16 12:06)資訊

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culture size 會影響的原因也很多. 但是妳可以把你的培養條件設成最佳. 那就可以排除他的問題. 比方說. 培養的體積跟錐瓶的比例. 溶氧率的維持. shaker 的轉速. 溫控. 有的人刁的話連培養基的 autocleave 時間也要控制. 因為煮太久焦糖化作用把 glucose 給破壞

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#3

Re: [問題] fusion protein的純化

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者bee (Bee)時間19年前 (2007/02/16 02:49)資訊

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culture size 會影響的原因也很多. 但是妳可以把你的培養條件設成最佳. 那就可以排除他的問題. 比方說. 培養的體積跟錐瓶的比例. 溶氧率的維持. shaker 的轉速. 溫控. 有的人刁的話連培養基的 autocleave 時間也要控制. 因為煮太久焦糖化作用把 glucose 給破壞

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#2

Re: [問題] fusion protein的純化

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者bee (Bee)時間19年前 (2007/02/16 02:37)資訊

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175mM 如果洗不出來. 有幾種可能. 第一個他的結合力太強......這種可能性不大但不是沒有. His-tag 有一個特色其實妳用到100 mM imidazole 就會開始有些蛋白開始洗出ꠊ只是量很少. 第二個. 我曾經用到 500 mM imidazole 沒有問題. 第三. 妳的蛋白根本

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#1

[問題] fusion protein的純化

推噓1(1推 )留言2則，0人參與作者yffurdyeknom (Unhurried Justice)時間19年前 (2007/02/16 02:18)資訊

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如題. 請問板上有做過帶有6 his-tag fusion protein純化的大大. 在從column上elute蛋白的時候. 是用多少imidazole濃度的elute buffer去elute的?. 小弟用175 mM imidazole的elute buffer去elute. 但似乎沒有el

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