討論串[求救] site-directed mutagenesis
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推噓9(9推 0噓 26→)留言35則,0人參與, 最新作者yummy770 (keep in touch)時間14年前 (2011/04/29 20:42), 編輯資訊
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各位前輩大家好,. 最近實驗室在進行將wild-type細胞改造成mutation type的細胞株. 由於實驗室除了教授外,目前只有我一人> <,所以來這邊詢問各位。. 查了很多資料,但都沒有這方面的資訊。. 可能我用的key word不夠準確。(ex establish mutation cel
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推噓2(2推 0噓 0→)留言2則,0人參與, 最新作者dodomilk (豆豆奶)時間14年前 (2011/05/11 09:58), 編輯資訊
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小弟在做ligation時,用BamHI切vector. 很不幸的是它亂切,切到比它該切的位置上游16個bp. 所以接起來的plasmid沒有inframe. 而且當初塗ligation的plate被我丟了,沒辦法挑新的colony養. 所以目前最快的方式應該是用site-directed muta

推噓3(3推 0噓 4→)留言7則,0人參與, 最新作者nhxcyge (人生就像個不可逆反應)時間13年前 (2011/11/11 20:28), 編輯資訊
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我現在是做A基因的點突變,. 用的方法是利用complement primer 25bp,而突變設計在中間. 利用這組primer做完pcDNA3-A一整圈plasmid,大小約6.7kb. 目前卡在PCR出來的產物很少很少,以致於做transform後都沒有colony長出來…. 曾想過把多管PC
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推噓3(3推 0噓 4→)留言7則,0人參與, 最新作者tutj (人生若只初相見)時間13年前 (2011/11/12 14:45), 編輯資訊
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complement primer應該是stratagene QuikChange的方法吧?你的Tm值是照說明書的公式算的嗎?. 我有找到一個網站可以幫忙算. http://depts.washington.edu/bakerpg/primertemp/primertemp.html. 如果你是照公
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推噓7(7推 0噓 11→)留言18則,0人參與, 最新作者aggaci (台南工作的基隆人)時間13年前 (2011/11/15 23:41), 編輯資訊
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我的方法不一樣 提供給大家. 我的是. P---------m----------->. ------------------------------------------------------ m:mutation. ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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