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討論串[求救] site-directed mutagenesis
共 9 篇文章
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※ 引述《nhxcyge (人生就像個不可逆反應)》之銘言：. 我的方法不一樣 提供給大家. 我的是. P---------m----------->. ------------------------------------------------------ m:mutation. ||||||
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大家好，又是我，但這次有新的問題，所以借用實驗設計時參考的文章. 這次是做single site 的 site-directed mutagenesis. 我有個Toxic insert一直很難clone，好不容易篩到colony卻有frameshift mutation. 所以我參考這篇文章跟內容
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最近在做A基因靠近3端不足100bp的點突變,. primer設計如下:. F -----m----------->. 5' ------------------------------------------------------3'. |||||||||||||||||||||||||||||
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http://blog.addgene.org/site-directed-mutagenesis-by-pcr. 以前我大約照上面這 protocol，一般都能做出來. 有時候我的 primer 會設計到接近 40 bp. 通常做不出來都是 PCR product 太少，跑 gel 看不到，. D
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