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討論串[求救] WB internal control 定量問題
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其實是我們家另一個助理到別人家去學回來的protocol，. 但是在一開始定量的部份讓我想破頭都不確定邏輯通不通.... 希望能有高手幫忙解惑，謝謝~. 我們家跑WB前會先把sample用分光光度儀，595 nm測吸光值後，. 算好個別濃度，再決定每個well要loading的量。. 別人家是不測吸
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43. 這邊我想請教的是, 你的材料來源為何? 我知道你要跑WB所以一定是下蛋白質.. 但是你用595nm 定量的原因是? 是細菌嗎?. 這邊提供一個方向可以參考. 常見的internal control 通常都是一些跟細胞含量有關係而非給藥與否相關的細胞蛋白.最常見的就是細胞骨架類蛋白質.. 他們
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前文刪光光. --. 我的材料來源是大鼠的脊髓，做的是有關神經損傷的部分，. 因為在取sample的時候，每隻不可能取到一樣重的脊髓，. 所以如下blence所說，之前學的都是前定量，用595 nm波長去測OD值，推算回蛋白濃度。. 我知道理論上internal control是要夠準才能當inte
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Hi, 我還是有些問題,. 這邊我覺得有趣的地方是, 你現在用595nm去定量你的蛋白檢體嗎？. 未經任何處置的那種？ 而且定量的實驗結果 是接近的？或是一致的？. 這樣說好了, 595nm 通常是Bradford protein assay才會用的波長. 而經過Bradford protein a
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跟老闆討論了一下這種方法是否可行. 老闆說不行.... 試著分享提到的幾個觀點. 1.WB經過一抗二抗呈色出來的不是線性放大. 所以此法不可行. (此外 我個人的經驗是 單單是曝光時間不同兩個band之間的倍數差異就會不同 可能1:2. 變成1:1.8之類). 2.蛋白質濃度定量是用某胺基酸(依不同
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