Re: [問題] 石蠟切片

看板Medicine (醫學生物)作者Euglena (靜心)時間17年前 (2008/09/22 21:34)推噓1(1推 0噓 0→)

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※ 引述《damnedest (ohoh)》之銘言： : ※ [本文轉錄自 Biotech 看板] : 作者: damnedest (ohoh) 看板: Biotech : 標題: [求救] 石蠟切片 : 時間: Mon Aug 25 21:07:54 2008 : 【問題】：石臘切片一直有出現刀痕，即使換了新刀片也沒有改善 : 且大多數的刀痕都出現在sample附近 : 【個人看法】：實驗室的學長認為是sample處理上的問題 : 不知道是否是自動脫水機reagen太久沒更新所致 : 但因自動脫水機還有其他lab也在使用， : 也問過常在使用的實驗室 : 並無出現相關問題 : 先來說說我的sample處理方式好了 : 這樣或許大家比較能夠幫我一起找出問題 : 我的sample是小鼠的thymus : 取下thymus後 : 先浸泡在1X PBS中 : 待將結締組織清除後 : 即丟入10% formalin中 : 4 degree overnight 不用放PBS，直接放10% formalin，室溫即可，或是微微加溫也可以，不過要注意不要煮熟了。然後像thymus這種富含lymphoid cell的tissue最好formalin泡overnight，不然細胞會縮小，影響判讀。 (不過也有可替代的，我忘記是不是B5還是別的。) : 隔天以1X PBS清洗後 : 把sample泡在70% EtOH中上兩個步驟可以省去。 : 並以自動脫水機處理o/n 自動脫水機的solution要定期更換，不然脫水會脫不完全。還有自動脫水機也要定時去清洗，用機器本身的program去清洗。 : 脫水完後 : 以wax包埋 : 以上 : 先謝謝大家幫忙了 1.換刀片 2.切之前過冰過久一點 3.撈片問題 4.脫水不完全挑個脂肪多的組織試試看如果連切都切不出來就是脫水不完全不過記得組織放小塊點喔 5.其他我也不知道耶哈問切片醫檢師都直接說就這麼切手感吧 -- I believe in Spinoza's God who reveals himself in the orderly harmony of what exists, not in a God who concerns himself with fates and actions of human beings. -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.133.165