Re: 問個pcr的小問題
※ 引述《ccjolin.bbs@bbs.badcow.com.tw (我也很盡心)》之銘言:
: ※ 引述《PD.bbs@bbs.isu.edu.tw (希望一切平安)》之銘言:
: : 你說的是RT-PCR嗎?
: : 如果是的話,RT時它是用來做primer,因為mRNA最後是poly-A
: : 不過加入的(做為primer)應該是poly-T
: 不是耶,我做的就是一般的PCR ^^"
: 那根RT也一樣嗎?
: 但是在做出來的片斷上應該有的是poly-A耶,
: 因為學長有建議我把接出來的片段放到TA-II vector裡面,
: 這個vector中不就是有poly-t的序列嗎?
: 那這樣在pcr的過程中,poly-A到底是怎麼產生的呢? @@~
妳作的應該是要把PCR的產物
放入TA clone 的plasmid吧?
一般來說PCR產物本來就會在兩端有多一個A和T
所以不需要而外的工作
PCR完成之後馬上可以作TAclone
and越新鮮越好.....TA的成功率會越高
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