Re: [問題] 關於DNA沉澱

看板Biology (生物學)作者 (pig)時間20年前 (2006/04/25 01:20), 編輯推噓0(001)
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※ 引述《fjubiology (Proposal結束)》之銘言: : ※ 引述《lovepig414 (pig)》之銘言: : : 抽DNA的時候(不論是否用kit抽) : : 最後都會加入99.9%酒精吧 好像還有一些鹽類 : : 這步驟好像就是沉澱DNA的吧 : : 不過是為什麼呢 是跟極性有關還是跟pH值有關呢 : : 真的是不懂壓 有人可以解答我的疑惑嗎 感恩唷 : 在適當濃度的陽離子(Na+, NH4)存在下,ethanol或isopropanol均可使核酸結構生改 : 變,分子聚集成團狀而從溶液中沉澱出來。Isopropanol相對於ethanol,其揮發性低 : ,在核酸沉澱後較不易自行揮發去除。且在以isopropanol沉澱DNA時,鹽類傾向與核酸 : 一起沉澱,因此一般在isopropoanol沉澱後,應以70% ethaol清洗DNA以便將鹽類去除。 : 沉澱DNA所需之ethanol體積:無水酒精(100%)為DNA體積2~2.5倍 : isopropanol體積為DNA溶液體積之0.6倍 : 樓上的應該是問這個,而不是70%酒精洗鹽的步驟。 恩 謝謝大大的回答 我是要問這個的 可是我還是不知道真正的原因耶 為什麼要用99.9%的酒精來將DNA溶解作沉澱 而70%酒精可用來清洗 是極性所導致的嗎? 阿可以解說一下 為什麼在適當濃度的陽離子下 (我想一般都是用醋酸鈉吧)分子會聚集成團呢? 是因為其為鹽類而解離出的正負電離子進而促使帶負電的DNA聚集嗎?那pH值有什묊麼影響呢?ꄹ因為醋酸鈉的pH值好像要配在5.5吧!那為什麼需要酒精呢?用鹽類不就可ꔊ以沉澱了嗎? 不好意思唷 我好像問太多了 不過我真的很想懂 這種資料應該很難找到吧 所以才問問大家的 希望 能移除疑惑再繼續做實驗囉 拜託有人解答唷 感恩똊 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.62.187.155

04/25 12:07, , 1F
想知道為什麼...問香蕉吧...
04/25 12:07, 1F
文章代碼(AID): #14JGZjmp (Biology)
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