Re: [問題] 關於DNA沉澱
※ 引述《lovepig414 (pig)》之銘言：
: ※ 引述《fjubiology (Proposal結束)》之銘言：
: : 在適當濃度的陽離子(Na+, NH4)存在下，ethanol或isopropanol均可使核酸結構生改
: : 變，分子聚集成團狀而從溶液中沉澱出來。Isopropanol相對於ethanol，其揮發性低
: : ，在核酸沉澱後較不易自行揮發去除。且在以isopropanol沉澱DNA時，鹽類傾向與核酸
: : 一起沉澱，因此一般在isopropoanol沉澱後，應以70% ethaol清洗DNA以便將鹽類去除。
: : 沉澱DNA所需之ethanol體積：無水酒精(100%)為DNA體積2～2.5倍
: : isopropanol體積為DNA溶液體積之0.6倍
: : 樓上的應該是問這個，而不是70%酒精洗鹽的步驟。
: 恩 謝謝大大的回答 我是要問這個的
: 可是我還是不知道真正的原因耶
: 為什麼要用99.9%的酒精來將DNA溶解作沉澱
: 而70%酒精可用來清洗 是極性所導致的嗎？
: 阿可以解說一下
: 為什麼在適當濃度的陽離子下 (我想一般都是用醋酸鈉吧)分子會聚集成團呢？
: 是因為其為鹽類而解離出的正負電離子進而促使帶負電的DNA聚集嗎？那pH值有什묊: 麼影響呢？ꄹ因為醋酸鈉的pH值好像要配在5.5吧！那為什麼需要酒精呢？用鹽類不就可ꔊ: 以沉澱了嗎？
: 不好意思唷 我好像問太多了 不過我真的很想懂 這種資料應該很難找到吧
: 所以才問問大家的 希望 能移除疑惑再繼續做實驗囉 拜託有人解答唷 感恩똊
乙醇沉澱時候，加入3M醋酸鈉至終濃度0.3M，或者5M氯化鈉至終濃度0.15M，
再加入2.5倍體積無水乙醇
其實這時候乙醇的濃度差不多就是70%-75%之間
不加入鹽的話，DNA沉澱效率會很低
之後再用75%乙醇洗沉澱是除去與DNA一起沉出的鹽，這時候由于DNA已經沉澱出來，
所以沒有鹽也不容易重新溶進75%乙醇裡
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◆ From: 202.127.20.26
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