Re: [問題] 關於gene knockout mice過程毛色的問題
※ 引述《antisense (sense)》之銘言：
: 【問題】：
: 請問教科書上面，將已作過one copy gene targeted的ES cell，放入psudopregnant mother
: 後，產生的後代，是chimeric mice，然後再將chimeric mice與正常的mice交配，來產生
: 最終的gene knockout mice
: 【問題起因】：
: 1 為何要利用chimeric mice與正常的mice交配，不直接讓chimeric mice之間相互交配產
: 生two copy knockout?
一般我們用的ES cells性染色體都是XY
因此做出來的chimeric mice中只有公的才有機會產生ES cells的子代
(似乎XY的germ cells無法分化成卵子)
除了極少數的狀況下XY的ES cells在胚胎早期產生XO的mosaic進而分化成卵子
(有人說有十分之一的機會 我覺得更低)
就算幸運有這種母鼠 他又不能被XY 的ES cells占掉多數的體細胞 (不然又變成公的了@@)
因此要交配公的和母的chimeric mice來得到homozygotes 機會微乎其微
此外
對於straight KO來說 homozygote通常不能只有一隻
所以千辛萬苦這樣得到的一隻homozygote還是要經過heterozygotes的交配過程來擴增
對於conditional KO 更需要和其他的transgenic mice來交配 (還是得經過het的過程)
所以這樣得到的homozygote也只能當control
: 2課本上說，chimeric mice和正常的mice交配，產生的knockout mice整個過程的基因型，
: 及毛色的表現型，到底是如何？
: 【個人看法】：
chimeric mice 基因型是 M/+(ES cell);+/+(host blastocysts) mosaic
假如說你的ES cells 是來自於黑色的B6 注進去白色的albino B6 blastocysts的話
毛色看起來是一斑一斑的
可以看起來從全白 少少的幾個黑斑 少少的幾個白斑 到全黑 (ES cells占據比例從少到多)
而這樣的chimeric mice和 albino B6母鼠交配的話
生出來的pups要嘛是一隻全黑(基因型可以是M/+ or +/+)的要嘛是一隻全白的(鐵定是+/+)
而黑鼠和白鼠的比例往往和chimeric father的黑毛比例正相關 (但不一定)
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