PTT職涯區 / Biology (生物學)

[問題] 關於western blot band的問題

看板Biology (生物學)作者 (rebeccalin)時間17年前 (2008/09/05 08:42), 編輯推噓3(3推 0噓 4→)
留言7則, 3人參與, 最新討論串1/1
【問題】：最近我跑的western blot membrane上的band都會有拖尾的問題(很嚴重) 並且在band的上頭會有像微笑標誌一樣彎起來， 想請問有經驗的大家，我要如何去改善個問題呢? (關於loading buffer的部分，我每次都有加熱10分鐘) 【問題起因】：不清楚 【個人看法】： 謝謝大家~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.25.94.198
推
09/05 11:58, , 1F
load sample之前~有先洗過well嘛!?
09/05 11:58, 1F
→
09/05 13:19, , 2F
我有先用針筒沖過我的well呢!
09/05 13:19, 2F
推
09/05 15:22, , 3F
SDSPAGE多厚/寬/長?用幾V/A跑多久?每lane load多少ug?含DNA?
09/05 15:22, 3F
→
09/08 09:35, , 4F
多寬多厚喔!我只知道我的後玻璃是1.5mm,短玻璃不太清
09/08 09:35, 4F
→
09/08 09:37, , 5F
處,用100V/15mA跑大概約2.5h,不含DNA,每個well有50ug
09/08 09:37, 5F
→
09/08 09:37, , 6F
的蛋白質,謝謝
09/08 09:37, 6F
推
09/09 01:36, , 7F
改load 15ug試看看, sample加熱95C三分鐘即可, buffer要均溫
09/09 01:36, 7F
‣ 更多 rebecca1985 的文章
文章代碼(AID): #18m823FZ (Biology)
Biology 近期熱門文章
更多 近期熱門文章 >>
PTT職涯區 即時熱門文章
更多 即時熱門文章 >>
‣ 更多 rebecca1985 的文章
文章代碼(AID): #18m823FZ (Biology)