Re: [問題] 蛋白質定量的檢測
※ 引述《gordonliu (阿拋)》之銘言：
: 【問題】：
: 1.Folin-酚試劑法(Lowry法)
: 2.Bradford法(考馬斯亮藍結合法)
: 3.Bicinchoninic Acid (BCA)法
: 想請問以這三種方法來測量
: 同一個蛋白質sample
: 為什麼三種方法檢測出來的蛋白質含量都不一樣
: 測量的原理我大概瞭解
: 可是有沒有高手能詳細解釋一下
: 謝謝~
我是低手，所以不能詳細解釋，XD.....
為啥這三種方法測到的蛋白質含量會差很多呢？
1. sample差異
像是如果sample中含有chlorophyll a的話，
Lowry assay會有干擾，倒楣的話可能會測到四倍高的含量，
但其他兩種不會有太大差異。
2. 實驗步驟
像是以TCA去沈澱蛋白質的話會讓Lowry和Smith assay（你說的BCA法）
所測到的蛋白質含量顯著的增高，但Bradford就沒有啥差異了
3. assay本身的問題
十多年前就發現Lowry有高估的現象（Smith也被認為有）
而Bradford比較不會被sample中的non-protein compound影響，
但要看你需要的方便程度還有sample決定你要用哪種方法
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◆ From: 140.112.52.216
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