Re: [問題] 抗體要怎麼壓才好呢?
※ 引述《pinrupony (pinrupony)》之銘言:
: 實驗室用的抗體是SANTA CRUZ的
: actin的比例是1:1000
: target的比例是1:200
: 目前使用的方式是一抗壓1小時,五分鐘洗三次
: 然後2抗壓1小時,五分鐘洗三次
: ECL的AB劑使用1:1的比例,
: 之後用冷光儀拍照,
: 這樣的方法,有時候band會很好看,
: 但有時候band看不到,整張膜超白的,
: 請問這樣是蛋白質的問題?還是抗體洗不乾淨?
actin的壓法
若是santacruz的抗體 因為他濃度比較稀
所以1:5K-10K 一抗室溫反應10分鐘後 換成wash buffer
這樣不會過強 很漂亮
其他的protein 不一定,得看表現量
santazruz的抗體好得很好 糟的很糟
你得先確妳你買的那隻能用嗎? 是否有paper用過?
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單身不代表寂寞,寂寞是走在一個不愛妳的人身邊的時候。
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推
06/08 13:27, , 1F
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