[問題] 關於culture

看板Biology (生物學)作者chauyow (prince)時間13年前 (2012/12/26 01:37)推噓1(1推 0噓 6→)

留言7則, 5人參與討論串1/1

想跟大大求救... 我的實驗主要是把血液中的PBMC分離出來之後在加上藥物去做培養經過7天之後收取soup 用ELISA測cytokine的濃度(IFN-g) 之前剛應徵進來的時候那時PI把我放到某研究所去學實驗當時做出來的測的Data 都還蠻正常的(至少所測得之濃度平均都還有20以上) 之後PI希望把這項實驗拿回某醫院操作(主要是希望用fresh的血液直接操作) 因此我一開始有從某研究所拿一些東西搬回到某醫院(配好的mediun 所需要測試的藥物 ...之類的) 一開始在某醫院操作時所跑出來的data與在某研究所時做的差不多只是到上個月發現說按照一樣的實驗步驟所測出來的值居然越來越低除了postive control的濃度可以到破百之外之外其餘所測試的只剩0.x或是1.x...這樣的濃度不知道問題到底出在哪裡在某醫院操作時除了機器設備之外一開始都是使用我從某研究所實驗室拿過來的東西到後來因為medium沒了也剛好是上個月我就在某醫院第一次配置medium 和之後把所測試之藥物重新配置換一批新的(重配置的藥物濃度也是按照當初某研究所的那間實驗室所給予的濃度) 這問題困擾我很久因此想請問各位大大有可能是cell culture時發生的問題嘛我所使用的medium是RPMI1640 外加AB型的人的serum 和PSA 最近的DATA 所測的的值是0.x or 1.x 應該可以代表在培養細胞時細胞養到後面是死光了所以才沒分泌吧只是一開始我在某研究所做的時候也是按照一樣的protocol這樣操作不懂搬回某醫院操作時最近的data就變成這樣我是懷疑是不是我在配置medium時有問題但收soup時 medium沒有混濁或是有漂流物因此我先排除有備污染的可能... 想請各位大大給些意見....@@ p.s...如果有實驗條件沒說清楚的我可以在補充感謝大家 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 114.25.163.23